Пробоподготовка инвитро что это

Пробоподготовка

Пробоподготовка — совокупность действий над объектом анализа (измельчение, гомогенизация, экстракция, гидролиз, осаждение и пр.) с целью превращения пробы в подходящую для последующего анализа форму (сухой остаток, раствор и пр.), состояние вещества (основание, солевая форма, гидролиз конъюгатов и пр.), а также для концентрирования/разбавления аналита и избавления от мешающих анализу компонентов.

Основная задача пробоподготовки — подготовка вещества, материалов, компонентов анализа для определенного вида анализа. Пробоподготовка помогает повысить точность получаемых результатов, расширить исследуемый диапазон значений, повысить безопасность исследования, ускорить тест, улучшить воспроизводимость и погрешность результатов.

Пробоподготовка используется в таких областях, как микроскопия, материалография, хроматография, спектроскопия, масс-спектрометрия, рентгеноструктурный и рентгенофлуоресцентный анализ, инструментальный и мокрый химический анализ, минералогические исследования и многие другие.

Содержание

Основные задачи пробоподготовки

Основное оборудование, используемое в пробоподготовке

Применение

Источники

См. также

Полезное

Смотреть что такое «Пробоподготовка» в других словарях:

пробоподготовка — сущ., кол во синонимов: 1 • подготовка (53) Словарь синонимов ASIS. В.Н. Тришин. 2013 … Словарь синонимов

Металлография — Микрофотография бронзы с литой дендритной структурой Металлография направление в металловедении, классический метод исследования и контроля металлических материалов, подготовка и изучение строения структуры … Википедия

Дифракция отражённых электронов — Картина, полученная методом дифракции отражённых электронов (National Institute of Standards and Technology Materials Reliability Division) … Википедия

подготовка пробы вещества [материала] (объекта аналитического контроля) — Ндп. пробоподготовка Совокупность процедур, проводимых с целью подготовки пробы вещества [материала] объекта аналитического контроля к определению ее состава и/или структуры, и/ или свойств. Примечание Процедура подготовки пробы вещества или… … Справочник технического переводчика

Атомно-эмиссионная спектроскопия — (спектрометрия), АЭС или атомно эмиссионный спектральный анализ совокупность методов элементного анализа, основанных на изучении спектров испускания свободных атомов и ионов в газовой фазе (см. группу методов оптической спектроскопии). Обычно… … Википедия

Лазерно-искровая эмиссионная спектрометрия — (ЛИЭС) один из методов атомно эмиссионного спектрального анализа, в котором используют спектры плазмы лазерного пробоя (лазерной искры) для анализа твёрдых образцов, жидкостей, газовых сред, взвешенной пыли и аэрозолей. В англоязычной… … Википедия

Рфа спектрометр — Исторический спектрометр графика Рентгенофлуоресцентный спектрометр пример Рентгенофлуоресцентный спектрометр Прибор, используемый для проведения элементного анализа состава вещества. Исследование производится путем возбуждения образца и… … Википедия

Титрование по Карлу Фишеру — Титрование по Фишеру Титрование по Карлу Фишеру классический метод титрования в аналитической химии, используемый для определения малого количества воды в анализируемой пробе. Метод был разработан в 1935 г … Википедия

подготовка — См … Словарь синонимов

Представительная проба — отобранная для анализа часть объекта, достаточно точно выражающая состав объекта. Эту условию могут удовлетворять лишь хорошо перемешанные жидкости и газы. В обеспечении представительности пробы нет необходимости, если объект достаточно однороден … Википедия

Источник

Пробоподготовка инвитро что это

Главная цель лабораторной диагностики – получение точных результатов анализов состояния здоровья.

Уважаемые пациенты, ниже представлены рекомендации для подготовки к отдельным видам лабораторных исследований. Соблюдение рекомендаций положительно влияет на точность и достоверность результата.

Основные преаналитические факторы, влияющие на достоверность исследований

Результаты анализа имеют референсный диапазон (или диапазон «нормальных» значений): минимальные и максимальные значения, полученные при обследовании статистически значимого количества здоровых людей в стандартных условиях (обычно при взятии крови в утреннее время).

Общие рекомендации по подготовке к лабораторным исследованиям:

Общие рекомендации обязательны для плановых исследований. В экстренных клинических ситуациях срочность получения лабораторных данных преобладает над значением возможных погрешностей в исследованиях и следует ориентироваться на соблюдение минимальных условий.

По предписанию врача рекомендации по подготовке к лабораторным исследованиям могут быть изменены (смена пищевого режима, выполнение провокационных и нагрузочных проб). Во всех остальных случаях следует придерживаться общих рекомендаций.

Капиллярная кровь

Исследование общеклинического анализа крови у детей (в случае взятия капиллярной крови) не имеет строгих преаналитических требований. Желательно придерживаться основных рекомендаций (по возможности утром, натощак), возможно взятие пробы в течение дня, а также после приема небольшого количества нежирной пищи. У грудных детей отбор пробы рекомендован перед очередным кормлением, при соблюдении обычного питьевого режима.

Таблица 1. Ограничения по времени суток и приему пищи при взятии проб крови на исследование

Таблица 2 Гормональные тесты (ограничения по времени суток и приему пищи):

Общие правила сбора мочи для анализа в контейнер с консервантом

Накануне сдачи мочи не рекомендуется употреблять ягоды, овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, вишня, черника и др.), не пить напитки, содержащие красители и стимулирующие диурез лекарства.

Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации во избежание получения ложных результатов.

Последовательность действий при сборе мочи

Доставить пробирку с мочой в медицинский офис необходимо в течение дня (по графику приёма биоматериала до 17.30. В любом другом случае пробирку с мочой следует хранить при температуре +2. +8°С (температурный режим бытового холодильника) не более 24 часов.

Правила сбора суточной мочи для биохимического анализа

Для биохимического исследования мочи биоматериал нужно собирать в течение суток. Для этого используют обычно специальную пластиковую емкость, которую можно приобрести в аптеке или банку объемом не менее 3 л., тщательно вымытую и простерилизованную.

Последовательность действий при сборе мочи (биохимический анализ)

Общие правила сбора мочи для определения дезоксипиридинолина (ДПИД)

Для исследования берут разовую порцию мочи (1-я или 2-я утренняя порция), взятую до 10 утра.

Накануне сдачи мочи на анализ не употреблять ягоды, овощи и фрукты, которые могут изменить цвет мочи (свекла, морковь, вишня, черника и др.), не пить напитки, содержащие красители и стимулирующие диурез лекарства.

Женщинам не рекомендуется сдавать анализ мочи во время менструации во избежание получения ложных результатов. Плановую лекарственную терапию, возможность и необходимость отмены перед исследованием рекомендуется обсудить с лечащим врачом.

Доставить пробирку с мочой в медицинский офис необходимо в течение дня (по графику приёма биоматериала до 17.30). В любом другом случае емкость с мочой следует хранить при температуре +2. +8°С (температурный режим бытового холодильника) не более 24 часов.

Общие правила сбора биоматериала для анализа «Катехоламины в моче»

Общие рекомендации по подготовке:

За два дня до сдачи мочи на анализ исключить из рациона продукты, повышающие содержание серотонина: все виды сыров, экзотические фрукты, орехи, бобовые, яйца, кондитерские изделия, содержащие ванилин.

На достоверность результатов анализа может влиять прием некоторых лекарственных препаратов: резерпин и другие препараты на основе раувольфии, нитроглицерин, кофеин, диуретики. В случае постоянного приема этих препаратов следует обсудить с врачом сроки и возможность их отмены на период сбора мочи. Самостоятельно отменять препараты нельзя.

За один день и в день сдачи анализа необходимо исключить напитки, содержащие кофеин, алкоголь, минимизировать физические и эмоциональные нагрузки, рекомендовано воздержаться от курения за несколько часов до начала и на протяжении всего периода сбора мочи.

При кризовом течении гипертонической болезни определение уровня экскреции катехоламинов целесообразно проводить в период повышения артериального давления.

Для транспортировки используют контейнер и пакет (конверт) с консервантом. Приобретение контейнера с консервантом возможно в любом медицинском офисе «iVITRO» (под залоговую стоимость).

В качестве консерванта применяется лимонная кислота, в пакете содержится 15 г. При общем объеме собранной суточной мочи менее 250 мл (суточная моча у детей менее 1 года) используется около 5 г консерванта (треть содержимого пакета). Если количество мочи за сутки превышает 250,0 мл, следует использовать порцию консерванта полностью.

Для хранения собираемой мочи в течение суток используют сухую чистую емкость объемом 2-3 литра (общая емкость), непосредственно для сбора мочи удобно использовать промежуточный контейнер, содержимое которого после мочеиспускания переливается в общую емкость. В период сбора и хранения мочи не рекомендуется использовать металлические предметы для перемешивания содержимого общей емкости с консервантом.

Последовательность действий для сбора мочи

В течение всего периода сбора мочи и до отправки ее в медицинский офис нужно строго соблюдать температурный режим (+2. +8°С). Материал должен быть доставлен в медицинский офис в день окончания его сбора.

Общие правила сбора биоматериала для анализа «Катехоламины в моче»

№152 – собранная моча менее чем за 24 часа

Общие рекомендации по подготовке:

За два дня до сдачи мочи на анализ исключить из рациона продукты, повышающие содержание серотонина все виды сыров, экзотические фрукты, орехи, бобовые, яйца, кондитерские изделия, содержащие ванилин.

На достоверность результатов анализа может влиять прием лекарственных препаратов: резерпин и другие препараты на основе раувольфии, нитроглицерин, кофеин, диуретики. В случае постоянного приема этих препаратов следует обсудить с врачом сроки и возможность их отмены на период сбора мочи. Самостоятельно отменять препараты нельзя.

За один день и в день сдачи анализа необходимо исключить кофеин (напитки и лекарства его содержащие), алкоголь, уменьшить физические и эмоциональные нагрузки. Рекомендовано воздержаться от курения за несколько часов до начала и на протяжении всего периода сбора мочи.

При кризовом течении гипертонической болезни определение уровня экскреции катехоламинов целесообразно проводить в период повышения артериального давления.

Для транспортировки, собранной мочи используется контейнер и пакет (конверт) с консервантом. Приобретение контейнера с консервантом возможно в любом медицинском офисе «iVITRO» (под залоговую стоимость).

В качестве консерванта применяется лимонная кислота, в пакете содержится 15 г. При общем объеме мочи за период сбора менее 250 мл необходимо использовать около 5 г (треть содержимого пакета). Если количество мочи за период сбора превышает 250,0 мл, следует использовать порцию консерванта полностью.

Для хранения мочи (за период менее 24 часов) используют сухую чистую емкость объемом 2-3 литра (общая емкость). Для сбора мочи удобно использовать промежуточный контейнер, содержимое которого после мочеиспускания переливается в общую емкость. В период сбора и хранения мочи не рекомендуется использовать металлические предметы для перемешивания содержимого общей емкости и консерванта

Последовательность действий для забора мочи

Правила сбора разовой порции: мочу собрать в сухую емкость, объемом не менее 500 мл, добавить консервант к моче, аккуратно перемешать (не используя металлические предметы). В стерильный контейнер (полученный в медицинском офисе) отлить порцию мочи, заполнив его на 1/3-1/2.

Правила сбора мочи за период менее 24 часов:

В течение всего периода сбора мочи и до отправки ее в медицинский офис нужно строго соблюдать температурный режим (+2. +8°С).

Контейнер с мочой должен быть доставлен в медицинский офис в день окончания сбора.

Сбор мочи на исследования по определению психоактивных веществ

Анализ не требует специальной подготовки и не имеет рекомендаций по изменению пищевого режима. Мочу на анализ можно собрать в любое время суток.

Для исследования необходима разовая порция мочи, собранная в стерильный контейнер, который можно приобрести в медицинском офисе под залоговую стоимость или в аптеке. Повторное использование контейнера не допустимо.

Последовательность действий для забора мочи

Емкость для сбора мочи необходимо заполнить целиком (не менее 90% объема) для предотвращения испарения под крышкой.

До отправки в медицинский офис контейнер с биоматериалом должен храниться при температуре +2. +8°С (температурный режим бытового холодильника).

Доставить материал в медицинский офис необходимо в течение дня. В любом другом случае емкость с мочой следует хранить при температуре +2. +8°С не более 12 часов

Сбор мочи для выполнения посева мочи (с определением чувствительности к антибиотикам)

Бактериологическое исследование мочи проводится до начала антибактериальной терапии или после окончания курса антибиотиков в установленные врачом сроки.

Биоматериал, собранный в мочеприёмник при наличии цистостомы или нефростомы для данного анализа не пригоден.

Сбор мочи можно проводить в любое время суток, рекомендуемым условием является перерыв между мочеиспусканиями 2-3 часа.

Для сбора биоматериала необходимо использовать стерильный контейнер и транспортный контейнер «Uri-swab». Контейнер «Uri-swab» состоит из пробирки с крышкой и аппликатора с тампоном-губкой (уро-тампон), плотно прикрепленного к крышке. Оба контейнера можно приобрести в медицинском офисе под залоговую стоимость

Перед сбором мочи обязательно провести тщательный гигиенический туалет наружных половых органов для избегания попадания в мочу бактерий с кожи наружных половых органов, сальных и потовых желез.

Последовательность сбора мочи для женщин:

Необходимо подготовить 6-10 ватных шариков, теплый мыльный раствор, емкость с теплой кипяченой водой, контейнер для сбора мочи.

Во время сбора мочи не следует касаться контейнером тел

При использовании уро-тампона (из системы «Uri-swab») необходимо открутить крышку емкости, вынуть из пробирки аппликатор с тампоном, не касаясь стенок контейнера. Погрузить уро-губку в собранную мочу на 5 секунд после чего вернуть тампон в пробирку. Уро-губку не отжимать.

Согласно инструкции по использованию системы «Uri-swab», допустимо поднести губку уро-тампона под среднюю струю мочи, не касаясь кожных покровов, дождаться полного пропитывания мочой (около 5 секунд). Затем вернуть в пробирку и плотно закрыть крышку.

Последовательность сбора мочи для мужчин:

При использовании уро-тампона (из системы «Uri-swab») необходимо открутить крышку емкости, вынуть из пробирки аппликатор с тампоном, не касаясь стенок контейнера. Погрузить уро-губку в собранную мочу на 5 секунд после чего вернуть тампон в пробирку. Уро-губку не отжимать.

Согласно инструкции по использованию системы «Uri-swab», допустимо поднести губку уро-тампона под среднюю струю мочи, не касаясь кожных покровов, дождаться полного пропитывания мочой (около 5 секунд). Затем вернуть в пробирку и плотно закрыть крышку.

Материал не принимается к исследованию в следующих ситуациях:

Доставить материал в медицинский офис необходимо в течение дня. Желательно доставить в охлажденном виде: можно использовать кубики льда или хладоэлементы. В любом другом случае емкость с мочой следует хранить при температуре +2. +8°С не более 10-12 часов.

Общие рекомендации для сбора анализа кала.

Необходимо помнить, что исследование кала на кишечный дисбактериоз проводится до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами. Сроки сбора биоматериала во время и после антибиотикотерапии обсуждаются отдельно с лечащим врачом (как правило не ранее 12 часов после отмены антибиотиков).

После рентгенологического исследования желудка и кишечника с контрастными веществами проведение анализа кала показано не ранее, чем через двое суток.

Кал, полученный после клизмы для исследования не пригоден.

Собирать кал нужно в стерильный контейнер (емкость с плотно завинчивающейся крышкой и ложечкой-шпателем внутри), который можно приобрести в медицинском офисе под залоговую стоимость или в аптеке.

Для исследования подходит только свежевыделенный кал.

Правила подготовки к исследованию:

Последовательность сбора кала для исследования:

Биоматериал не должен содержать посторонних примесей, поэтому подкладное судно (горшок) предварительно необходимо помыть мыльным раствором, затем тщательно промыть водой несколько раз и ополоснуть кипятком. Обязательно высушить.

Источник

Пробоподготовка. Характеристика биологических объектов.

» data-shape=»round» data-use-links data-color-scheme=»normal» data-direction=»horizontal» data-services=»messenger,vkontakte,facebook,odnoklassniki,telegram,twitter,viber,whatsapp,moimir,lj,blogger»>

Пробоподготовка. Характеристика биологических объектов.

Пробоподготовка. Стадия включает очистку от примесей и загрязнений, которые не следует отбрасывать, так как они могут быть источником дополнительной информации. Пробоподготовка – стадия риска потерять анализируемое вещество и объект. Поэтому все предпринимаемые действия должны быть логически оправданы и направлены на сохранение образцов, отобранных для анализа, для дальнейшего исследования.

Моча – наиболее распространенный объект исследования на лекарственные токсичные соединения и наиболее простой биообъект для анализа вследствие низкого содержания белковых компонентов.

Важным показателем мочи как биообьекта является рН, поэтому работа с ней требует постоянного внимания к изменению рН. Величина рН мочи повышается со временем из-за действия бактериальной флоры, выделяющей аммиак. Такое увеличение можно предотвратить путем хранения ее при пониженных температурах (при анализе очень лабильных веществ – в замороженном виде).

Необходимо учитывать также, что при хранении мочи в холодильнике в ней происходит новообразование этанола до концентрации 0,5 ‰. При сахарном диабете новообразование этанола в моче, хранящейся в холодильнике, доходит до 1,1‰. Вместе с тем следует помнить, что при большом объеме воздушного слоя во флаконе над кровью или мочой происходит окисление алкоголя и снижение его содержания в объекте.

Действие бактериальной флоры можно замедлить добавлением натрия фторида, кислоты борной и других бактериостатических препаратов, однако надо учитывать их дальнейшее участие в экстракции и образовании фона. Мочу можно лиофилизировать, предварительно переведя летучие соединения в соответствующие соли.

При анализе мочи и других биологических объектов на содержание одурманивающих веществ необходимо обращать внимание на потенциальные фоновые соединения как эндогенного, так и экзогенного характера, присутствие которых в анализируемом образце неизбежно при любом способе пробоподготовки.

Из потенциальных эндогенных соединений необходимо отметить присутствие низкомолекулярных продуктов метаболизма аминокислот и сахаров (амины, мочевина, карбоновые кислоты, соли карбоновых кислот и др.), небольших количеств пептидов и сахаров (в норме), стероидов, пигмента уробилина, окрашивающего мочу в желтый цвет и других веществ.

К фоновым экзогенным соединениям относятся продукты биотрансформации веществ, поступивших с пищей, и различных лекарственных веществ, используемых наркоманами для усиления наркотического эффекта, снятия синдрома абстиненции, смягчения “выхода” из состояния наркотического опьянения (барбитураты, производные 1,4-бензодиазепина), а также метаболиты других химических веществ, попавших в организм (красители, антиоксиданты, продукты табакокурения и т.д.).

На содержание эндогенных и экзогенных компонентов в пробе влияют:

Пробоподготовка мочи
Может состоять из различных операций: прямое концентрирование (упаривание некоторого количества мочи до небольшого объёма на водяной бане либо роторном испарителе), экстракция растворителями, лиофилизация, хроматографическое разделение или сорбция на твердом сорбенте или комбинация различных операций (концентрирование – экстракция, лиофилизация – экстракция и др.).

Пробоподготовка крови.
Уровень токсических веществ и их метаболитов у живых объектов и в крови трупа неодинаков вследствие биохимических изменений. Содержание токсического вещества в артериальной или венозной крови также будет различным. Даже положение тела у живого пациента – стоя, сидя или лежа – влияет на биохимический состав пробы, так как в этом случае меняется содержание белков в крови, что особенно важно для токсических веществ, в значительной степени связывающихся с белками.

Обработке экстракцией может быть подвергнута цельная кровь, плазма или сыворотка. Если для предотвращения свертывания крови использовались антикоагулянты, то необходимо учитывать, что гепарин вытесняет жирные кислоты из мест их связывания с альбумином.

Это влияет, с одной стороны, на увеличение связывания токсических веществ с белками, с другой – на переход жирных кислот в органический растворитель при экстракции. Для уменьшения энзиматической активности кровь рекомендуется хранить в холодильнике в замороженном виде.

Поскольку стеклянные стенки посуды содержат большое количество свободных гидроксильных групп, возможно связывание полярных токсических соединений стенками посуды за счет образования водородной связи. Это явление особенно важно учитывать при анализе следовых количеств вещества.

Предварительное силилирование стенок посуды позволяет свести это явление к минимуму. Альтернативой является использование посуды из полипропилена или тефлона, хотя при этом необходимо считаться с загрязнением пробы мономерами смолы.

Из эндогенных соединений помимо жирных кислот в экстрактах из крови встречаются различные стероидные гормоны (тестостерон и др.), холестерин, которые в крови находятся в связанном состоянии с протеинами плазмы. При хранении крови более суток при комнатной температуре происходит новообразование алкоголя, достигая концентрации 1 ‰.

Пробоподготовка слюны
Слюна является продуктом секреции желез ротовой полости. Отобранную пробу центрифугируют и для хранения замораживают, чтобы замедлить активность ферментов. Хранить лучше всего слюну в склянках из тефлона или полипропилена, чтобы избежать поглощения следовых количеств анализируемого вещества стенками стеклянной посуды.

Установлено, что неионизированные формы токсического вещества, находящиеся в водном растворе плазмы, пассивно диффундируют в слюну, так что существует прямая зависимость между концентрацией анализируемого вещества в слюне и его концентрацией в крови.

Пробоподготовка волос
Волосы представляют относительно гомогенный (с точки зрения агрегатного состояния) биологический субстрат. Являясь легкодоступным для отбора, они представляют значительный интерес в качестве объекта при проведении химико-токсикологического анализа как на неорганические, так и на органические вещества.

При анализе волос наркотики могут быть обнаружены в отдаленные сроки после окончания их приема и в тех случаях, когда анализ биожидкостей дает отрицательный результат. Использование волос в качестве объекта исследования позволяет проследить динамику поступления наркотического вещества в организм человека. Анализ волос длиной 6-8 см (6-8 месяцев) позволяет судить о степени наркотической зависимости.

По сравнению с биожидкостями, исследование твердых кожных образований имеет целый ряд отличительных особенностей, которые накладывают отпечаток на все этапы проведения работ.

Исследование волос включает в себя две принципиально важные с точки зрения интерпретации результатов стадии:

Основные методы разрушения волос:

Пробоподготовка желчи
Желчь является продуктом секреторной деятельности печени, желчного пузыря и двенадцатиперстной кишки. Эта жидкость содержит большое количество воды, эндогенных веществ, подобных тем, которые находятся в крови, плазме и сыворотке, а также желчные кислоты и пигменты.

Желчь различается по величине рН (в пределах 6,7-8,3), что заставляет контролировать рН в ходе подготовки к экстракции, а при необходимости использовать подходящий буфер. Рекомендуется пробу также центрифугировать при низких скоростях (для удаления холестерина) и осадить белки добавлением смеси хлороформ – метанол (2:1) или хлороформ – изопропанол (9:2).

Пробоподготовка печени
Печень представляет собой центральный орган химического гомеостаза. В печени находится большое разнообразие экзогенных и эндогенных веществ: продукты белкового, углеводного, жирового обменов, продукты биотрансформации экзогенных, в том числе токсических веществ.

С точки зрения присутствия эндогенных и экзогенных веществ в экстракте из печени этот объект является самым неудобным вследствие их большого разнообразия. Даже самая длительная и многоэтапная экстракция, например, кислых лекарственных средств дает в хлороформном экстракте до восьми разнообразных эндогенных соединений.

Источник