Проба квейма зильцбаха что
Проба квейма зильцбаха что
Исследования Daniele и Rowlands (1976a) показали также, что увеличено количество клеток, не образующих Е-розетки, ЕАС розетки и не имеющих иммуноглобулиновых поверхностных маркеров (т. е. нуль-клеток). Еще неясно, являются ли они Т- или В-клетками, мембраны которых блокированы неантительным ингибитором, или же незрелыми клетками, или клетками с каким-либо другим нарушением морфологии мембран, но их несомненно важно распознавать при количественных определениях лимфоцитов в этих случаях.
При саркоидозе часто повышен общий уровень сывороточного комплемента, определяемого по гемолитическому комплементу (СН50 или С3) [Sheffer et al., 1971]. Hedfors и Norberg (1974), пользуясь методом агрегации тромбоцитов, обнаружили признаки иммунных комплексов. В небольшом числе наших собственных случаев, особенно у больных с узловатой эритемой, наблюдалось также превращение комплемента из С3 в С3b. Упомянутое выше наличие ревматоидного фактора, возможно, также является признаком циркулирующих иммунных комплексов. Пока еще патогенная роль иммунных комплексов в тканевых проявлениях саркоидоза не доказана, но данные Salo и Hunnukselo (1972), полученные при помощи метода иммунофлюоресценции, позволяют предполагать эту роль.
Иммунные комплексы, соединенные с поверхностью некоторых лимфоцитов, могут объяснять также наличие экзогенно приобретенного иммуноглобулина на мембранах части лимфоцитов, как упоминалось выше.
Реакция Квейма при саркоидозе
Доказано, что экстракты, приготовленные из саркоидной ткани обычно селезенки или лимфатических узлов, стимулируют образование саркоидной гранулемы на протяжении 4—6 нед у больных саркоидозом, по лишены этого действия в контрольных группах [Kveim, 1941] (рис. 51). Из многих видов материалов, которые применяются сейчас, три селезенки были источником реактивов Квейма, использованных в ряде исследований: J (Siltzbach), CSL (Hariey) и К12 (Bradstreet). Недавно было много споров о том, можно ли вызвать реакцию на антигены Квейма при других болезнях, включая болезнь Крона, при использовании некоторых партий К12 и старых партий CSL Mitchell et al., 1970; Hurley ot al., 1975], однако подобных реакций не наблюдали другие авторы, применявшие селезенку J [Siltzbacli et al., 1971b].
Этот вопрос довольно подробно обсуждают Mitchell и Scadding (1974). По-видимому, разные результаты получаются при применении разных «партий» различных суспензий, т. е. некоторые «партии» чаще вызывают реакции при болезни Крона и язвенном колите, чем остальные. Тесты Квейма, видимо, положительны главным образом в ранних и активных случаях болезни, они реже положительны на более хронических стадиях. Реакции Квейма оказались отрицательными у больных с бериллиевой болезнью [Siltzbacli, 1964]; у больных проказой результаты сомнительны [Pearson et al., 1969]. Тот факт, что некоторые «проверенные» суспензии Квейма могут вызвать положительные реакции у больных с некоторыми другими болезнями, важен, если рассматривать значение теста Квейма в связи с реактивностью организма при гранулематозах вообще.
Результаты тестов in vitro с использованием лимфоцитов от больных саркоидозом и суспензии Квейма интересны, но их трудно трактовать. Согласно морфологическим критериям, бласттрансформация, видимо, чуть повышена, но поглощение тимидина лимфоцитами не увеличено (это поглощение указывает на повышенный синтез ДНК или РНК) [Siltzbacli et al., 1971а]. Было обнаружено выраженное подавление миграции лейкоцитов [Hardt, Wanstrup, 1969; Jones-Williams et al., 1972, 1974]. Однако другим авторам не удалось создать удовлетворительной тест-системы [Topilsky et al., 1972]. Некоторые исследователи получили положительные результаты при болезни Крона [Brostoff, Walker, 1971; Willonghby, Mitchell, 1971].
И опять важное значение может иметь «партия» материала Квейма, применяемая для тестов [Mitchell, Scadding, 1974]. Cohn и соавт. (1967) и Douglas (неопубликованные данные) установили, что субклеточная фракция, ответственная за положительные реакции, представляет собой связанные с мембраной плотные цитоплазматические немитохондриевые органеллы, возможно, лизосомальные.
Недавние экспериментальные исследования показали, что гомогенаты свежей саркоидной ткани при введении в подушечки лапок мышей линии СВА индуцируют медленное развитие местных и диссемипированных эпителиоидных и гигантоклеточных гранулем, а гомогенаты этих гранулем, взятые на месте первой инъекции или из других мышиных тканей, индуцируют гранулемы при введении следующим поколениям мышей [Mitchell, 1976]. В этой серии опытов были получены два успешных пассажа и у некоторых из животных реакции Квейма были положительными, согласно тестам, поставленным спустя несколько месяцев. На основании этой серии экспериментов можно полагать, что саркоидный ответ может быть передан на протяжении двух пассажей.
— Вернуться в оглавление раздела «Пульмонология.»
Проба квейма зильцбаха что
Так как текст написан человеком, не имеющим медицинского образования, он может содержать неточности вследствие отсутствия глубокого понимания проблемы. Информация предназначена для пациентов. Сообщения об ошибках, замечания и дополнения с благодарностью будут приняты.
Александр Белоусов sarcoidosis@yandex.ru
Загадка реактива Квейма
Норвежский дерматолог Ансгар Квейм (Ansgar Kveim) (1892-1966) в 1941 г. обнаружил, что внутрикожное введение ткани лимфатического узла, пораженного саркоидозом, вызывает образование папулы у 12 из 13 больных саркоидозом. Одновременное контрольное введение антигена Фрея (используется для выявления венерической лимфогранулемы) и туберкулина (используется для обнаружения туберкулеза) не давали реакции. Поскольку реакция не происходила у здоровых и у пациентов с обыкновенной волчанкой (lupus vulgaris), он заключил, что папулы вызваются неизвестным агентом и что такой тест может использоваться, чтобы дифференцировать саркоидоз от туберкулеза.
Луис Зильцбах (Louis Siltzbach) (1906-1980) усовершенствовал этот тест, использовав суспензию селезенки. Тест был назван пробой Квейма–Зильцбаха. В настоящее время проба представляет собой внутрикожное введение пастеризованной суспензии селезенки, пораженной саркоидозом. В месте введения постепенно появляется папула, которая достигает максимального размера (3–8 см) через 4–6 недель. Биопсия этой папулы в 70–90% случаев у больных саркоидозом позволяет обнаружить изменения, подобные саркоидозу.
При участии Луиса Зильцбаха было проведено международное исследование, подтвердившее специфичность теста Квейма–Зильцбаха ( Siltzbach LE: An international Kveim test study. 1960-1966. In Turiaf J, Chabot J (eds): La Sarcoidose. Paris, Masson & Cie, 1967, p 201). Результаты исследования позволяют утверждать, что саркоидоз вызывается единственным антигеном, так как несколько тысяч подтвержденных биопсией случаев саркоидоза во всем мире демонстрировали реакцию на реактив Квейма–Зильцбаха, выделенный из селезенки единственного пациента. Более вероятно, что единственный антиген вызвает реакцию у пациентов во всем мире, чем предположение, что в реактиве Квейма–Зильцбаха содержится множество различных антигенов.
Было установлено, что антиген, вызывающий саркоидоз также содержится в клетках бронхоальвеолярного лаважа. Паралельное введение реактива Квейма–Зильцбаха и клеток бронхоальвеолярного лаважа пациентам с саркоидозом приводило к формированию гранулем, которые имели аналогичный клеточный состав и структуру.
Было выяснено, какие именно клетки содержат фактор, вызывающий формирование саркоидных гранулем (его часто называют гранулемогенным фактором). То это этот фактор был связан с макрофагами, которые принимают участие в формировании гранулемы, неудивительно. Неожиданным оказалось то, что моноциты периферической крови уже были связаны с гранулемогенным фактором перед дифференцированием в альвеолярные макрофаги и также вызывали формирование гранулем. Это объясняет развитие саркоидоза у реципиента после пересадки костного мозга от пациента с саркоидозом.
Ученые сошлись во мнении, что установление природы действующего начала антигена Квейма–Зильцбаха, приведет к установлению причины саркоидоза. Однако, все оказалось не так просто.
Проблемы теста Квейма–Зильцбаха
Считается, что для развития гранулемы на месте введения реактива Квейма–Зильцбаха достаточно 4–6 недель. Однако, характерный ответ иногда развивался значительно позднее. Известен случай, когда когда тест Квейма дал положительный результат через 4 месяца после внутрикожной инъекции.
Так как реактив Квейма–Зильцбаха содержит неизвестный антиген, природа которого не известна, есть гипотетическая опасность заражения пациента. Эти опасения еще больше усилились после того, как была предположена роль L-форм микобактерий в развитии саркоидоза. L-формы имеют очень маленький размер и могут проходить через фильтры, которые используются для приготовления реактива Квейма–Зильцбаха.
По этим причинам попытки разработать более специфичный и безопасный аналог антигена Квейма не прекращаются. В 1990 г. японские ученые сообщили о получении моноклональных антител, специфически реагирующих на эпителиоидные клетки саркоидных гранулем. Недостатком этих антител была слабая положительная реакция на эпителиоидные клетки туберкулезных гранулем. Спустя 9 лет, эти же ученые сообщили о разработке двух новых моноклональных антител, свободных от этого недостатка. Свои антитела также разработали английские и финские ученые. Хотя антиген, на который реагируют эти антитела все еще не идентифицирован, это может быть полезным инструментом для изучения этиологии саркоидоза.
Эти факторы привели к тому, что интерес к оригинальному антигену Квейма постепенно снизился, он недоступен для широкого применения, поскольку отсутствует в виде стандартного промышленно выпускаемого диагностикума, его использование не одобрено управлением по санитарному надзору за пищевыми продуктами и медикаментами (FDA). Поэтому он применяется редко, наиболее часто в Англии и США.
Исследования реактива Квейма
Хотя в настоящее время антиген Квейма предствляет скорее исторический интерес, попытки выявления гранулемогенного фактора в реактиве Квейма пролили свет на возможную природу саркоидного антигена.
В антигене Квейма не был найден бериллий. Такое исследование было предпринято из-за похожести бериллиоза и саркоидоза.
В попытке идентифицировать природу действующего начала реактива Квейма, он был подвергнут воздействию различных химических агентов. Пациентам с саркоидозом проводилась одновременная внутрикожная инъекция антигена Квейма, нормального и обработанного различными веществами. Реактив Квейма был устойчив к воздействию ДНК-азы (фермент, катализирующий расщепление полинуклеотидной цепи ДНК), рибонуклеазы (фермент, катализирующий расщепление молекулы РНК), проназы (фермент, ращепляющий гликопротеины), 95 % фенола, нейтрального детергента (поверхностно-активное вещество, используются как антисептик и дезинфецирующее средство) и к экстракции липидов с помощью метанола/хлороформа.
Химический анализ обработанного антигена Квейма показал, что он сохранил свою гранулемогенную активность несмотря на удаление углеводов и фильтации через фильтр с диаметром отверстия 0.2 mum.
Так как многие ученые предполагают, что саркоидоз имеет бактериальную причину, была предпринята попытка обнаружения бактериальной ДНК в реактиве Квейма с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Проводился поиск рибосомной 16S-рРНК, которая является частью бактериальной рибосомы и присутствует практически у всех бактерий. Два различных реактива Квейма, подготовленных из материала здоровой и саркоидной селезенки по одинаковой методике, были проанализированы с помощью ПЦР. Метод был достаточно чувствительным и был способен обнаружить по крайней мере 10 геномов Escherichia coli. Исследования реактива Квейма и контрольного реактива показали, что оба они не имеют бактериального загрязнения. Поскольку реактив Квейма в отличие от контрольного реактива вызывает формирование гранулемы, эти результаты не поддерживают гипотезу, что действующее начало реактива Квейма имеет бактериальную природу.
В 2007 г. известный исследователь саркоидоза David R. Moller опубликовал результаты исследования, которое было направленно на идентификацию слабо растворимых белковых структур с физико-химическими свойствами, подобными свойствам белков, входящих в реактив Квейма. После отделения 99% начальной массы саркоидной ткани, в отставшейся части был идентифицирован белок, который был идентифицирован как каталаза-пероксидаза Mycobacterium tuberculosis (mKatG). Поскольку этот белок является нежизнеспособным фрагментом Mycobacterium tuberculosis, автор предположил, что саркоидоз вызвается эффективным ответом хозяина на микобактериальную инфекцию, что приводит к формированию депозитов микобактериальных антигенов и белков хозяина, которые формируют очаги для формирования гранулем. Это вызывает Th1 ответ, который разрешается только при эффективном удалении стимулирующих антигенов. Хотя автор с помощью моноклональных антител к mKatG доказал, что обнаруженный белок является именно mKatG, не было сделано два важных шага. Не было проверено, инактивируют ли моноклональные антитела к mKatG оригинальный антиген Квейма и вызывает ли mKatG классическую реакцию Квейма у пациентов с саркоидозом. Поэтому, пока нельзя достоверно утверждать, что именно mKatG является действующим началом антигена Квейма. Возможно, этих белков несколько. Должны быть обнаружены специфические Т-клетки, предназначенные для борьбы с mKatG. Связано ли присутствие этих клеток со спонтанной ремиссией а их отсутствие с хроническим саркоидозом? Какие механизмы участвуют в удалении депозитов mKatG из ткани? Эти и другие вопросы нуждаются в дальнейших исследованиях.
Действуюшее начало антигена Квейма подобно улыбке Чеширского кота: кота до сих пор не удалось обнаружить даже самыми современными методами, но его улыбка (способность вызывать формирование гранулем) постоянно витает над исследователями саркоидоза, вызывая по словам Нормана Соскела, страх и восхищение. Спустя 75 лет после открытия реактива Квейма, он все еще привлекает внимание ведущих исследователей саркоидоза и для его изучения используются самые передовые технологии, включая протеомику.
Проба Квейма
В далеком 1941 году ученый из Норвегии, Ansgar Kveim, установил интересный факт: внутрикожная инъекция ткани саркоидозного лимфатического узла приводила к образованию папулы, несколько возвышающейся над уровнем кожи. Подобный диагностический подход был назван в честь дерматолога – проба Квейма.
Исторические сведения
Ansgar Kveim в исследовании установил, что совместное введение туберкулина (проба Манту для диагностики туберкулеза) не давало кожной реакции. Ученый отмечал, что саркоидозный компонент, введенный в организм, в большинстве случаев приводил к положительной реакции, тем самым позволяя отличить саркоидоз от туберкулеза.
Louis Siltzbach работал с подобным тестом чуть позже и сделал его совершеннее, используя для пробы суспензию селезенки человека, достоверно больного саркоидозом. Именно в таком виде и проводилось исследование в дальнейшем: внутрикожная инъекция подтверждала саркоидоз, если в месте введения образовывалась папула до 10 сантиметров. Контроль пробы осуществлялся в течение 1-1,5 месяца.
В 1960-1967 годах при участии Луиса Зильцбаха проводилось масштабное международное исследование, подтверждавшее информативность пробы Квейма-Зильцбаха при саркоидозе.
Именно в те времена ученые решили, что стоят на пороге открытия точной причины заболевания. К сожалению, этого не вышло.
Отрицательная сторона пробы Квейма
При дальнейшей работе исследователи обнаружили сразу несколько негативных моментов:
Таким образом, с течением времени было решено приостановить практическую работу с пробой Квейма, оставив такую возможность только исследователям.
Проба Квейма-Зильцбаха: исследования
Было установлено, что в реактиве Квейма (то есть суспензии) присутствует особый антиген. Этот же антиген можно найти у людей в смыве с мелких альвеол и бронхов, что наблюдается при бронхоскопии. Как введение реактива, так и введение клеток бронхоальвеолярного лаважа пациентам с саркоидозом, приводило к формированию гранулем.
В дальнейшем реактив подвергался различным испытаниям в виде обработки рядом химических веществ. Ученые обратили внимание и на возможность бактериальной природы заболевания: при помощи ПЦР (полимеразная цепная реакция) пытались найти генетический материал бактерий. Реактив, вызывающий гранулемы, оказался стерилен, тем самым отрицая бактериальную природу саркоидоза.
Вместо заключения
Вот что говорит о пробе Квейма Лестер Н. Плосс, доктор медицины (Фрипорт, Нью-Йорк):
«Тест Квейма-Зильцбаха представляет собой введение реагента, то есть суспензии в виде частиц, приготовленной из гранулематозной ткани селезенки пациента с саркоидозом – в кожу человека с подозрением на системное заболевание. Приблизительно у 50-80 % пациентов с саркоидозом наблюдается положительная реакция и развиваются неказеозные гранулемы в месте инъекции, что видно по биопсии кожи через четыре-шесть недель. Процент ложноположительных результатов котируется на уровне 1-5%, хотя большинству базовых данных более 40 лет.
Будучи инструментом для неинвазивной диагностики саркоидоза, проба больше не используется в клинической практике. Причины этого прекращения – это доступность биопсии, трудности с получением клинически подтвержденного реагента Квейма и возможность передачи заболевания при инъекции ткани человека. Реакция Квейма до сих пор полностью не изучена, и активный компонент того, что вызывает антигенный ответ, не был идентифицирован. Как таковой, он все еще используется в исследовательских целях, чтобы лучше понять этиологию саркоидоза».
Саркоидоз легких
Как определить саркоидоз легких
Саркоидоз легких представляет собой доброкачественный системный гранулематоз, который сопровождается поражением лимфатической ткани, мезодермальной паренхимы респираторного тракта, других внутренних органов.
Причины развития
Точная этиология саркоидоза до настоящего времени не установлена. Считается, что его развитие ассоциировано с:
Стадии и формы заболевания
Практикующие специалисты разделяют саркоидоз по результатам рентгенологического исследования на следующие стадии и формы:
Симптомы и первые признаки
На ранней стадии саркоидоза пациенты жалуются на:
Прогрессирование патологического процесса сопровождается поражением кожных покровов, органов зрения, костной ткани и лимфатических узлов, сильным кашлем, одышкой, признаками сердечной и легочной недостаточности.
Осложнения
Чаще всего саркоидоз осложняется бронхо-обтурационным синдромом, эмфиземой легких, дыхательной недостаточностью, легочным сердцем. В некоторых случаях присоединяются неспецифические инфекционные процессы, аспергиллез, туберкулез.
Саркоидные гранулемы могут формироваться в паращитовидных железах, вызывая гипер-паратиреоз и нарушение обмена кальция, органах зрения и приводить к полной слепоте.
Диагностика саркоидоза легких
Диагностирование данного заболевания основано на итоговых данных:
Методы лечения
Начальные стадии саркоидоза требуют соблюдения пациентом особой белковой диеты, ограничивающей потребление соли, и мониторинга его состояния в виду частых спонтанных ремиссий. При тяжелом течении патологического процесса назначают:
Выздоровевшие пациенты находятся на диспансерном наблюдении в течении пяти лет.
Саркоидоз легких
Симптомы саркоидоза
Болезнь может развиваться годами и особо себя не проявлять. Иногда она протекает и вовсе бессимптомно и случайно выявляется при плановой рентгенографии.
Симптомы саркоидоза легких неспецифические. Их легко можно спутать с признаками других болезней. При этой патологии человек жалуется на:
В любом случае подобные симптомы – это повод обратиться к врачу и тщательно обследоваться. 
Причины саркоидоза
Причины саркоидоза до сих пор не определены. Существует несколько теорий возникновения патологии.
К группе риска относят курильщиков, а также людей, чья профессиональная деятельность связана с химической промышленностью, сельским хозяйством, тушением пожаров.
Стадии саркоидоза
Специалисты классифицируют стадии саркоидоза по-разному. Некоторые придерживаются трех этапов развития патологии. Другие применяют более подробную классификацию и выделяют пять стадий. Мы остановимся на последнем варианте и опишем пять ступеней развития патологии. Именно эта классификация включена в международные рекомендации по лечению болезни.
0 – На этой стадии проявления заболевания и изменения на рентгеновском снимке грудной клетки могут не наблюдаться. Поражения легких нет, но это не исключает саркоидоз других органов.
1 – В этот период развития болезнь может проявляться незначительными симптомами: кашлем, одышкой при нагрузке, слабостью и небольшой температурой. Внутригрудные лимфоузлы увеличены. Паренхима легких, то есть, ткань дыхательного органа, не изменена.
2 – На этой стадии симптомы становятся более явными. К ним относят температуру до 40 °С, боли в грудной клетке, слабость и потливость, кашель. Лимфоузлы увеличены, паренхима легких уже начала подвергаться изменениям.
3 – К симптомам добавляются неврологические изменения. Легочная паренхима поражена, но лимфоузлы не увеличены.
4 – На этой стадии выявляется необратимый фиброз легких. Одышка прогрессирует, кашель усиливается. Из-за нехватки кислорода неврологические симптомы проявляются сильнее. Гранулемы разрастаются и в легких, и в других органах. Повышаются риски осложнений.
Диагностика
Для постановки диагноза врач:
Лечение саркоидоза
Лечение саркоидоза находится в ведении врача-пульмонолога. Часто пациенты с симптомами саркоидоза попадают сначала к онкологам или врачам-фтизиатрам. После исключения опухолей и туберкулеза больные обращаются к пульмонологам, которые и ставят диагноз «саркаидоз».
Недуг в некоторых случаях может пройти самостоятельно. Ремиссия возникает спонтанно на первой стадии болезни у 30% пациентов с диагнозом «саркоидоз легких». Обычно больным с бессимптомным течением заболевания рекомендуют раз в три месяца посещать пульмонолога, сдавать анализы крови. Если патология не прогрессирует, состояние больного не ухудшается, врач наблюдает пациента в динамике. 
Прогрессирующие признаки саркоидоза, которые должны насторожить:
Лекарственных препаратов, влияющих на саму причину болезни, пока нет.
Назначаемое медикаментозное лечение ставит перед собой несколько задач:
Врач-пульмонолог назначает гормональную терапию и лекарства для усиления иммунитета. Если саркоидоз не лечить, то ситуация будет усугубляться. Из-за поражения легочной ткани проявится дыхательная недостаточность и другие серьезные осложнения.
Предотвратить саркоидоз нельзя. Но, несмотря на то, что специфической профилактики болезни нет, все же стоит придерживаться общих правил, направленных на укрепление иммунитета: сбалансированное питание, соблюдение режима сна и отдыха, адекватные физические нагрузки и отказ от вредных привычек. Крепкий иммунитет поможет организму лучше справляться с любыми болезнями.