Положительная экспрессия p16 о чем говорит

Положительная экспрессия p16 о чем говорит

Риск рака шейки матки является вторым по частоте онкологическим заболеванием, угрожающим жизни женщины. Несмотря на достижения в диагностике, лечении и исследованиях этого заболевания, смертность в развивающихся странах продолжает оставаться высокой. Так, в 2008 году было зарегистрировано 529000 новых случаев и 275000 смертей от рака шейки матки. Прошло более 40 лет со времени открытия возбудителя этого заболевания. В 1970-х Harold zur Hausen предположил наличие корреляции между инфицированностью ВПЧ и развитием неопластических процессов в шейке матки. Вирус обладает высоким сродством к сквамозным эпителиальным клеткам и легко инфицирует их. Поражение вирусом, тем не менее, зависит от взаимодействия нескольких факторов: онкогенов, генов восстановления ДНК и генов-супрессоров опухоли [5].

Важное значение в профилактике рака шейки матки имеют диагностические программы обследования женщин. Заболеваемость раком шейки матки в мире колеблется в значительных пределах, и зависит во многом от экономической составляющей. Так, в США заболеваемость раком шейки невысока, в 2016 году 12990 женщин заболели и 4120 умерли от этого заболевания. Анализ показывает, что причиной этого является применение современных диагностических технологий, так женщинам в возрасте 21–29 лет раз в 3 года проводится анализ, предусматривающий гистологическую оценку методом жидкостной цитологии [6].

Применение Рар теста в гинекологической практике явилось фактором, поднявшим диагностику рака шейки матки на новый уровень. Вместе с тем, заболеваемость и смертность от рака шейки матки остается высокой, несмотря на контроль с помощью Рар теста, что указывает на ограниченные возможности этого диагностического метода. Частыми причинами ложных результатов анализа являются гиперплазия клеток, воспалительная атипия и сквамозная метаплазия. Наличие этих факторов приводит к необходимости повторных исследований или проведению более травматичных процедур [1]. Рак шейки матки вызывается 14 типами вируса папилломы человека (ВПЧ), а типы 16 и 18 являются причиной заболевания в 70 % случаев. Известно, что ВПЧ инфекция определяет развитие рака шейки матки, однако иммунная система в большинстве случаев обеспечивает элиминацию вируса в течение одного или двух лет [3, 4].

Современные программы скрининга основаны на жидкостной цитологии, включающей забор пробы маленькой пластиковой щеткой в питательную жидкую среду с целью дальнейшего приготовления мазков. Цервикальная цитология зависит от получения хороших образцов и экспертной интерпретации микроскопической картины, что практически не выполнимо без соответствующего оборудования и подготовки.

Весьма перспективным тестом диагностики дисплазии и рака шейки матки может быть иммуноцитохимическое определение повышенной экспрессии гена-супрессора p16INK4a. В норме, кодируемый этим геном, белок p16INK4a блокирует вызываемую фактором роста стимуляцию деления клетки за счет угнетения циклин- зависимой киназы, что приводит к нарушению фосфорилирования белка ретинобластомы (БРБ). В этих условиях БРБ связывается с фактором транскрипции Е2F, блокирует его митотическую активность и останавливает деление клетки. Однако, при ВПЧ инфекции, встроенная в геном хозяина ДНК вируса начинает синтезировать два онкогена, Е6 и Е7. Онкоген Е7 связывается с белком ретинобластомы, препятствуя ингибированию E2F. Это приводит к неконтролируемому делению клетки и повышенному синтезу белка p16INK4a, что может быть зафиксировано с помощью цитоиммунохимическиой реакции [2]. Определение онкобелка p16INK4a позволяет вявить ранние стадии возникновения предрака и рака шейки матки. По эффективности этот тест является более релевантным, чем генотипирование ВПЧ или кольпоскопия.

Материалы и методы исследования

В сети медицинских клиник MedSwiss программой ДМС предусмотрено скрининговое исследование ранних пролиферативных процессов шейки матки. Эта программа включает:

1. Анализ данных жидкостной цитологии с поверхности шейки матки в режиме реального времени с применением компьютеризированной программы BD Focal Point и определение онкопротеина p16INK4a

2. ПЦР-тест на выявление основных 14 типов ВПЧ при первичном обследовании пациентки

3. Расширенное кольпоскопическое исследование на приеме у гинеколога.

В рамках этой программы при первичном осмотре у гинеколога пациенткам проводится Рар-тест в современной модификации, основанной на жидкостной цитологии. С этой целью одновременно из трех зон (поверхность шейки матки, из цервикального канала и зоны трансформации) берется биологический материал и помещается в виалу. Клеточный состав пробы обогащается, окрашивается на 2 стеклах и анализируется (на первом этапе одна проба) с помощью линейки приборов BD PreMate, BD SurePath, BD Focal Point.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты исследования, степень дисплазии клеток, представляются по Цитологической классификации ВОЗ (CIN I, CIN II и CIN III) и Цитологической классификации Бетесда (ASCUS, LSIL и HSIL). В случае обнаружения патологических изменений проводится исследование второй пробы на экспрессию белка p16INK4a. Одновременно всем пациенткам проводится анализ на выявление ВПЧ методом ПЦР диагностики (14 типов вируса). Неотъемлемым компонентом первичного обследования гинеколога является расширенная кольпоскопия.

Важным компонентом алгоритма является интегрированная оценка анализа жидкостной цитологии, наличия ВПЧ в анализе ПЦР и данных кольпоскопии. Действительно, часто интегративный анализ всех трех компонентов- положительная ПЦР, результаты жидкостной цитологии и кольпоскопии является определяющими при дальнейшем обследовании и ведении таких пациенток. Так, при положительном анализе ПЦР диагностики на наличие вируса высокого онкогенного риска (типы 31, 33,35, 39,45,51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 и особенно 16 и 18) и характерных изменениях данных жидкостной цитологии возможно отсутствие визуальных изменений при кольпокопии.

В зависимости от инфицированности ВПЧ, результатов цитологического исследования и наличия белка p16INK4a нами разработаны были дорожные карты ведения пациенток, предусматривающие схемы от наблюдения до медикаментозного лечения и хирургической деструкции шейки матки [4].

Заключение

Таким образом, применение теста на белок p16INK4a позволяет повысить и специфичность, и чувствительность диагностики при дисплазии шейки матки, обеспечивая адекватное ведение пациенток с этой патологией [7].

Тактика ведения пациенток с патологией шейки матки. Лечение – медикаментозные методы лечения. Сокращения: ИМТ – иммуномодулирующая терапия; ПВТ – противовирусная терапия; ХДШМ – хирургическая деструкция шейки матки; ЖЦ – жидкостная цитология

Источник

Сдать анализ на коэкспрессия онкобелков p16/ki67

Описание

Папилломавирусная инфекция — одна из самых распространенных инфекций. По разным данным, вирусом папилломы человека (ВПЧ) инфицировано 50-70% населения. Основной путь передачи — половой.
Все типы вируса папилломы человека подразделяют на группы высокого, среднего и низкого онкогенного риска.
Наиболее опасна группа ВПЧ высокого онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 типы. ВПЧ высокого онкогенного риска вызывает диспластические изменения в клетках эпителия шейки матки, которые в дальнейшем могут переходить в рак шейки матки.
При этом с ВПЧ 16 и 18, а также 45 типа связывают 70% случаев рака шейки матки.

Следует иметь в виду, что организм способен самостоятельно элиминировать ВПЧ в течение 6-12 месяцев — такая картина наблюдается в 80-90% случаев. Элиминация вируса происходит при достаточно высоком уровне иммунитета.
Генитальный вирус папилломы человека– это одна из самых широко распространенных инфекций, передающихся половым путем. Длительность инкубационного периода может составлять от нескольких месяцев до 10-ти лет. В большинстве случаев заболевание протекает в скрытой форме без клинических проявлений.

Исследование «Коэкспрессия онкобелков р16/Ki67» назначается дополнительно к услуге 031212 «ВПЧ-ПАП-тест жидкостный» и помогает установить повышенный риск наличия диспластических изменений и рака шейки матки. Определение коэкспрессии p16 и Ki-67 является одним из важных критериев для дифференциального диагноза дисплазии умеренной и высокой степени тяжести и начальных форм рака шейки матки.
Положительный результат исследования «Коэкспресия онкобелков p16/Ki67» является показанием для более тщательного обследования женщины на наличие предраковых поражений шейки матки с помощью кольпоскопического и гистологического исследований.

Белок р 16 является естественным ограничителем деления клеток. Иными словами, данный белок вырабатывается для того, чтобы остановить деление клетки в физиологическом цикле. Влияние белка на механизм деления клеток весьма сложный, но конечный результат зависит от уровня данного белка. Именно он тормозит пролиферацию, вырабатываясь клеткой на ее поверхность.

Антиген Ki 67 также встречается в нормальной клетке и оказывает обратное онкобелку р16 действие, а именно стимулирует деление клеток. Данный механизм также физиологичен, поэтому только обнаружение данного белка не может рассматриваться как абсолютный критерий. Именно поэтому имеет смысл оценивать наличие обоих онкобелков, так как только в случае бесконтрольного деления клеток возможно одновременное их присутствие. Обычно именно при неоплазиях (дисплазиях, раке) отмечается такое хаотичное образование новых клеток, нетипичного строения.

В ходе проведенных исследований стала очевидна связь между появлением онкобелков и прогнозами имеющегося заболевания, а именно женщины с выявленной коэкспрессией должны быть более тщательно обследованы. Так, даже при легкой дисплазии должен быть решен вопрос о необходимости гистологического исследования. Н-SIL в таких случаях однозначно требует проведения конизации, более того, гистологическое исследование может быть пересмотрено дважды.

Показания

Важно!
Все вышеперечисленные показания могут быть определены в ходе ежегодного обследования шейки матки, которое подразумевает проведение ПАП-теста, ВПЧ-скрининга. Если ПАП-тест был выполнен методом жидкостной цитологии, то исследование на определение онкобелков может быть дополнительным к ранее заказанному ПАП-тесту. Дозаказ возможно сделать в течение 30 дней.

Интерпретация результата

Результаты лабораторных исследований не являются единственным критерием, учитываемым лечащим врачом при постановке диагноза и назначении соответствующего лечения, и должны рассматриваться в комплексе с данными анамнеза и результатами других возможных обследований, включая инструментальные методы диагностики.
В медицинской компании «LabQuest» Вы можете получить персональную консультацию врача службы «Doctor Q» по результатам исследований во время приема или по телефону.

Источник

Коэкспрессия онкобелков p16/Ki67

Тест «Коэкспрессия онкобелков р16/Ki67» назначается дополнительно к услуге 031212 «ВПЧ-ПАП-тест жидкостный» и позволяет выявить женщин, у которых высокая вероятность обнаружения предраковых изменений и рака шейки матки.

Рак шейки матки занимает второе место по частоте среди злокачественных новообразований репродуктивной системы у женщин после рака молочной железы. Доказана роль вируса папилломы человека (ВПЧ) в развитии рака шейки матки. Важно вовремя выявить предраковые изменения шейки матки и предотвратить переход их в рак! Каждая женщина после начала половой жизни ежегодно должна проходить обследование у гинеколога, а для выявления предраковых изменений шейки матки 1 раз в 3-5 лет! В последнее время в акушерско-гинекологическую практику для раннего выявления предраковых изменений шейки матки, наряду с определением ВПЧ и цитологических мазков, активно внедряется определение белков р16 и Ki-67. Одновременная секреция их (коэкспрессия) свидетельствует о нарушении регуляции клеточного цикла и об онкологических изменениях эпителия шейки матки, вызванных вирусом папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска.

Показаниями для назначения услуги 031216 «Коэкспрессия онкобелков p16/Ki67» в лаборатории CMD являются следующие результаты услуги 031212 «ВПЧ-ПАП-тест жидкостный»:

Положительный результат исследования «Коэкспресия онкобелков p16/Ki67» является показанием для более тщательного обследования женщины на наличие предраковых поражений шейки матки с помощью кольпоскопического и гистологического исследования.

Внимание! Тест «Коэкспрессия онкобелков p16/Ki67» можно дозаказать к услуге 031212 «ВПЧ-ПАП-тест жидкостный» в течение 30 календарных дней от даты регистрации услуги 031212. Необходимо обязательно указать номер пробы, под которым образец проходил в CMD.

Источник

Комплексное исследование: коэкспрессия p16 и Ki67 (CINtec PLUS) и жидкостная цитология BD SurePath (ПАП – тест)

Комплексное исследование: коэкспрессия p16 и Ki67 (CINtec PLUS) и жидкостная цитология с окраской по Папаниколау (ПАП – тест) предназначено для раннего выявления предраковых (диспластических) изменений шейки матки у пациентов с носительством ВПЧ по назначению лечащего врача.

Общая информация

Дисплазия в клетках эпителия шейки матки – это трансформация клеток, способная привести к раку шейки матки. Выделяют дисплазию I, II и III степени, её также называют CIN – цервикальная интраэпителиальная неоплазия. Рак шейки матки прогрессирует достаточно медленно, поэтому своевременная диагностика и лечение диспластических изменений имеет очень важное значение. С этой целью проводятся скрининговые цитологические исследования здоровым женщинам. Предпочтительным методом является жидкостная цитология с окрашиванием по Папаниколау (PAP-тест). Но в некоторых случаях только цитологического исследования недостаточно, есть риск пропустить изменения, предшествующие раку. Особенно это касается длительного носительства ВПЧ онкогенных типов (16, 18, 31, 33, 45 и т.д)

Белки p16 и Ki67 не могут в здоровых клетках быть активны одновременно. P16 – маркер, тормозящий пролиферацию клеток (бесконтрольное размножение), в норме p16 изолированно определяется в зоне трансформации эпителия (место перехода одного вида эпителия в другой). Белок Ki67 отражает пролиферацию клеток. Одновременная экспрессия (коэкспрессия) p16 и Ki67 в одной клетке свидетельствует о нарушении процессов клеточного цикла и говорит о возможности онкотрансформации клетки.

В каких случаях показано исследование в первую очередь?

Длительное носительство ВПЧ высокого онкогенного риска

Как выполняется исследование?

Жидкостная цитология BD – автоматизированная методика изготовления монослойных препаратов.

Определение коэкспрессия p16 и Ki67 – иммуноцитохимический метод окрашивания клеток с применением набора реагентов CINtec+.

Что означают результаты теста?

Результат интерпретируется специалистом совместно с другими исследованиями.

Заключение цитологического исследования представлено согласно классификации Бетесда и ВОЗ.

Коэкспрессия p16 и Ki67 в норме – не обнаружена.

Выявление HSIL (CIN II-III) и коэкспрессии p16 и Ki67 говорит о предраковых изменениях шейки матки

LSIL, ASCUS, ASC-H по результатам цитологического исследования и коэкспрессия p16 и Ki67 требуют углубленного обследования на предмет исключения CIN II-III.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Предпочтительный биоматериал – смешанный соскоб шейки матки и цервикального канала. Исследование не проводится в период менструации и в течение нескольких дней после ее окончания и при нелеченных ИППП; до исследования не рекомендуется использовать спринцевания, вагинальные свечи, спермицидные средства, лубриканты в течение 48 часов.

Источник

Положительная экспрессия p16 о чем говорит

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова; Московский физико-технический институт

Клиническая значимость иммуногистохимического исследования экспрессии биомаркера p16 ink4a биоптата шейки матки у молодых и юных женщин

Журнал: Российский вестник акушера-гинеколога. 2013;13(6): 19-24

Фириченко С. В., Манухин И. Б., Кондриков Н. И., Мочальникова В. В., Мишутина А. А., Мынбаев О. А. Клиническая значимость иммуногистохимического исследования экспрессии биомаркера p16 ink4a биоптата шейки матки у молодых и юных женщин. Российский вестник акушера-гинеколога. 2013;13(6):19-24.
Firichenko S V, Manukhin I B, Kondrikov N I, Mochal’nikova V V, Mishutina A A, Mynbaev O A. Clinical value of immunohistochemical study of p16ink4a expression in the cervix uteri biopsy specimens of young and adolescent women. Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2013;13(6):19-24.

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова

Кафедра акушерства и гинекологии №1 лечебного факультета Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова; Московский физико-технический институт

Несмотря на то что регресс поражения при CINII, особенно у молодых женщин, происходит намного чаще (от 39 до 65%), чем при CINIII [8, 15, 20], большинство экспертов считают, что пациенткам с CINII требуется лечение [6, 28] и, согласно настоящим рекомендациям, при CINII пациенткам вне беременности показано эксцизионное лечение, аналогичное CINIII-поражениям. Однако считается, что гистологическая диагностика при CINII характеризуется низкой воспроизводимостью [2, 12, 17, 25]. При этом существенная часть поражений CINII при пересмотре микропрепарата представляет собой CINIII [26].

Материал и методы

Данное проспективное когортное исследование было выполнено c 2006 по 2013 г. в рамках гранта Президента РФ №3643.2006.7 «Сохранение репродуктивного здоровья у женщин с предраком шейки матки» и научно-исследовательской клинической разработки Московского государственного медико-стоматологического университета (МГМСУ) им. А.И. Евдокимова Минздрава РФ №01201252730 «Микроэкология организма человека и аспекты иммунной регуляции на примере заболеваний кожи и слизистых оболочек, ассоциированных с вирусом папилломы человека».

На втором этапе те образцы, которые оба или хотя бы один из патоморфологов оценивали как CINII, были отобраны для проведения иммуногистохимического исследования (ИГХИ) экспрессии p16 ink4a и повторной «слепой» оценки. Все случаи биопсии, однозначно оцененные на первом этапе обоими патоморфологами как норма, CINI или CINIII, исследованию на экспрессию p16 ink4a не подвергались. ИГХИ проводили на депарафинированных срезах толщиной 4 мкм с использованием диагностического набора. Интенсивную и распространенную экспрессию p16 ink4a в ядре клетки или ядерно-цитоплазматическое окрашивание клеток базального слоя, вовлекающее, по крайней мере, 1 / 3 толщины эпителия, оценивали как положительный ответ. Центральное или неоднородное окрашивание ядра, а также рассеянное или только цитоплазматическое окрашивание оценивали как отрицательный ответ.

Результаты

После ИГХИ экспрессии p16 ink4a в 75 образцах CINII на втором этапе заключения патоморфологов совпали в 55 наблюдениях (табл. 2). При этом результаты переоценки образцов после ИГХИ в 33 случаях совпали с первоначальной интерпретацией гистологических микропрепаратов, окрашенных ГЭ, и соответствовали CINII. Однако в 16 случаях оценка тяжести поражения была совместно снижена до CINI или нормы, и, напротив, в 8 случаях диагноз был изменен до CINIII.

Данные об окончательном распределении гистологических диагнозов между патоморфологами, полученные с учетом дополнительного ИГХИ экспрессии p16 ink4a CINII-биоптатов, представлены в табл. 3. При этом совпадение результатов оценки поражения отмечено в 146 (71%) образцах.

Обсуждение

Ведущие международные экспертные организации считают необходимым лечение CINII и CINIII как истинных предраковых состояний с высоким риском прогрессии [6, 28]. Гистологическая оценка прицельного биоптата у пациенток с CIN остается основной для принятия решения об эксцизии. Однако, если у женщин с реализованной репродуктивной функцией может быть использован подход «see and treat» [14, 18], т.е. лечебно-диагностическая эксцизия пораженного участка шейки матки без предварительной биопсии, то у юных и молодых женщин такой подход считается слишком агрессивным.

В соответствии с обновленными рекомендациями (2013) Американского общества кольпоскопии (ASCCP) начинать скрининг следует с 21 года, а под юными подразумеваются женщины до 24 лет [19]. Именно этой группы касаются охранительные рекомендации по выжидательному ведению CINII. В большинстве стран Европы к скринингу привлекают с 25 лет [5]. Вопрос его начала в РФ является дискуссионным.

В настоящее время выбор биомаркеров для дифференциальной диагностики сомнительных результатов гистологического исследования конкретного биоптата все еще остается прерогативой патоморфологов. Однако так же, как ВПЧ-ДНК-тест стал сортировочным для сомнительных цитологических заключений, таких как ASC-US, так и определение экспрессии p16 ink4a должно стать стандартом сортировки при неопределенных результатах гистологического исследования прицельного биоптата шейки матки, особенно, когда речь идет о юных женщинах.

Выводы

Показатель экспрессии p16 ink4a в биоптате шейки матки является ключевым критерием в выборе тактики ведения молодых и юных пациенток с неопределенными результатами его гистологического исследования (CINII). При этом вероятность правильной интерпретации результатов биопсии каждым патоморфологом существенно повышается, что позволяет обоснованно принять решение о целесообразности эксцизии шейки матки либо наблюдения.

Источник