Прямая проба кумбса что это такое
Прямая проба кумбса что это такое
Принцип антиглобулинового теста Кумбса. Антиэритроцитные антитела неполного типа и молекулы комплемента (С), находящиеся на поверхности эритроцитов выявимы — прямой тест — их агглютинацией в контакте с животной сывороткой, содержащей антитела на человеческий антиглобулин (антиглобулиновая сыворотка). Свободные в сыворотке неполные антитела выявляются — косвенный тест — их закреплением на смеси нормальных эритроцитов группы 0, все антигены которых принадлежат известной резус-системе, далее агглютинируемые под воздействием антиглобулиновой сыворотки.
Материалы, реагенты антиглобулинового теста Кумбса: пробирки на 10/100 мл; градуированные пипетки на 1, 2 мл; пастеровские пипетки; штативы; предметные нешлифованные стекла; 8,5‰ раствор NaCl; эритроциты. Эритроциты больного, равно как и принадлежащие к группе 0 получим из свежеотобранной крови на противосвертывающем веществе (раствор ЭДТА).
Эритроциты группы 0 отобрать с таким расчетом, чтобы они исходили от лиц в норме и содержали все антигены резус-системы. Их можно сохранять до 7 дней в аутологической плазме, при температуре + 4°С. В случае отсутствия эритроцитов группы 0, известной антигенной мозаики, можно использовать смесь эритроцитов группы 0, резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов.
Сыворотка больного должна быть свежеотобранной.
Техника антиглобулинового теста Кумбса:
а) Прямой тест Кумбса: эритроциты больного промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl.
На несколько предметных стекол нанести по крупной капле из разведений антиглобулиновой сыворотки, а рядом — по маленькой капле из осадка эритроцитов больного; перемешать капли углом стекла. Приготовленный материал оставить на столе 5 мин., затем исследовать на наличие агглютинатов. В случае положительного результата определить максимальный агглютинирующий титр.
б) Косвенный тест Кумбса: эритроциты группы 0, резусположительные и резус-отрицательные промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl и подвергнуть воздействию сыворотки больного из расчета 2 капли эритроцитов на 8—10 капель сыворотки, затем, в течение 60 мин., провести инкубацию при температуре 37°С. После этого снова трижды промыть эритроциты и воздействовать на них антиглобулиновой сывороткой, по указаниям для прямого теста Кумбса.
Когда речь идет о холодовых активных антителах сенсибилизацию эритроцитов группы 0 провести 60 мин. при температуре + 4°С.
Примечание: 1) Не проводить прямой тест Кумбса на эритроцитах, сохраненных один или несколько дней при температуре + 4°С или комнатной температуре, поскольку результаты могут оказаться ложноположительными за счет фиксации имеющихся в нормальной сыворотке непол ных, активных на холоде антител. 2) В случаях выраженной гиперпротеинемии промывать эритроциты 4—5 раз и проверить отсутствие сывороточных белков в последней промывной жидкости, с помощью сулфосалициловой кислоты.
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Проба Кумбса
Количество пациентов разного возраста с заболеваниями крови увеличивается с каждым годом. Проба Кумбса – клиническое исследование крови на выявление в организме человека антител, представляющих угрозу для здоровья. Является важным диагностическим методом в акушерстве, реаниматологии, хирургии, гематологии.
Показания к проведению
Планирование беременности и подготовка к родам. Позволяет выявить присутствие антител к резус-фактору в крови женщин во время беременности.
Необходимость переливания крови. Тест выявляет для какого типа крови пациент может стать донором.
Плановое хирургическое вмешательство. Если произойдет кровопотеря, врач заранее будет знать группу и резус-фактор пациента.
Диагностика гемолитических заболеваний.
Типы проб
Выделяется 2 разновидности:
Прямая – позволяет обнаружить антитела на поверхности эритроцитов. Это необходимо для диагностики уже имеющихся гемолитических патологий. Иногда к проведению теста Кумбса прибегают в том случае, когда необходимо выявить причины развития таких патологий, как анемия и желтуха.
Непрямая проба Кумбса – помогает выявить антитела в плазме крови, что необходимо для оценки совместимости при переливании и диагностики рисков резус-конфликта во время беременности.
Подготовка к процедуре и проведение
Особой подготовки для взятия крови на анализ не требуется. Чтобы результаты анализы не были искажены, нужно приостановить на время прием лекарственных препаратов. Ограничений в еде или режиме питания нет.
за 3 суток откажитесь от алкоголя
последний прием пищи должен быть за 8 часов до взятия крови на анализ
за 1 час откажитесь от курения, физических, умственных и эмоциональных нагрузок
перед процедурой выпейте стакан чистой негазированной воды
При проведении прямой пробы Кумбса из вены с помощью шприца берется кровь. Перед началом проведения процедуры выполняется тщательная дезинфекция места прокола, а после забора материала для исследования налаживается вата либо стерильная марля. В том случае, если анализ проводится у новорожденных, то кровь берется из пуповины.
После проведения процедуры можно продолжить прием лекарственных средств в обычном режиме.
Результаты исследования
Положительная реакция Кумбса говорит о факте резус-сенсибилизации организма, что является главной причиной резус-конфликта в случае переливания крови или при вынашивании ребенка с иным резус-статусом.
Отрицательная непрямая проба говорит о совместимости крови донора с кровью реципиента (или крови матери и ребенка) по резус-фактору. Отрицательная прямая проба свидетельствует о том, что специфические антитела к резус-фактору, связанные с эритроцитами, в крови отсутствуют и не могут являться причиной гемолиза.
Как быстро известен результат пробы?
Обращаясь в частный медицинский центр «Медюнион», вы можете сдать анализ в наиболее удобном для вас месте: прямо в клинике или на дому.
Анализ на пробу Кумбса выполняется в течение 1 дня и в стандартном режиме будет готов через сутки после взятия крови. Все данные автоматически высылают на электронную почту пациента, указанную при регистрации в клинике.
Проба Кумбса
Поликлиника Отрадное предлагает сдать анализ в наиболее удобном для вас месте: в условиях клиники или на дому.
Анализ на пробу Кумбса выполняется в течение 1 дня и в стандартном режиме будет готов через сутки после взятия крови. Все данные автоматически высылают на электронную почту пациента, указанную при регистрации в клинике.
Показания к проведению пробы
Из множества существующих антигенов в медицинской практике наибольшее значение уделяется трем типам агглютиногенов крови. Одним из них является тип ответственный за проявление резус-фактора: если он присутствует на мембране эритроцита, диагностируют Rh+ группу крови, если отсутствует – Rh-. Если в состав резус-отрицательной крови попадают эритроциты с агглютиногенами Rh+, организм запускает реакцию иммунного ответа и начинает вырабатывать антитела к этому антигену, что становится причиной патологических состояний.
Справка! Резус-фактор — сложная многокомпонентная система из нескольких десятков антигенов. Наиболее часто встречаемые из них — агглютиногены типа D (85% случаев), а также E и C.
Пробу Кумбса проводят только при наличии прямых показаний. Общий список причин для назначения пробы Кумбса:
Более конкретные показания зависит от типа проводимого исследования.
Прямая проба Кумбса
Прямой тест позволяет обнаружить антитела на поверхности эритроцитов. Это необходимо для диагностики уже имеющихся гемолитических патологий:
Гемолиз кровяных элементов наблюдается при онкологических, инфекционных, ревматических заболеваниях, поэтому прямая проба Кумбса может использоваться как дополнительное средство диагностики патологического состояния. При этом стоит помнить: отрицательное значение анализа не исключает вероятность гемолиза, а является поводом для дополнительного обследования.
Непрямая проба Кумбса
Непрямая проба чаще применяется для предотвращения патологических ситуаций. Она помогает выявить антитела в плазме крови, что необходимо для оценки совместимости при переливании и диагностики рисков резус-конфликта во время беременности.
Проба Кумбса при ведении беременности
Более 80% людей имеют положительный резус-фактор (Rh+), соответственно, чуть менее 20% являются резус-отрицательными. Если у Rh- матери развивается Rh+ ребенок, ее организм начинает вырабатывать антитела, атакующие эритроциты плода, провоцируя гемолиз.
С учетом того, что процент “разнорезусных” браков достигает 12-15%, риск гемолитической болезни новорожденных должен быть велик, но в реальности лишь в 1 из 25 подобных случаев у женщин наблюдается явление сенсибилизации (на 200 успешных родов 1 пример гемолитической патологии). Частично это обусловлено тем, что первый резус-положительный ребенок обычно не вызывает открытой агрессии организма матери; подавляющее количество случаев приходится на второго и последующих детей. Действует тот же принцип, что и при обычной сенсибилизации к тому или иному аллергену.
При первом контакте реакции не происходит. Организм только знакомится с новым для него антигеном, вырабатывая антитела класса IgМ, которые отвечают за быстрый иммунный ответ, но редко проникают через плацентарный барьер в кровь ребенка. Все патологические реакции проявляются при повторной “встрече”, когда в организме начинают вырабатываться антитела класса IgG, легко проникающие в кровоток плода, запуская процесс гемолиза.
Непрямая проба Кумбса при беременности позволяет обнаружить наличие антител в организме матери и вовремя выявить начальную стадию сенсибилизации. Положительный ответ, требует постановки на учет с ежемесячным исследованием титра антител и обязательной госпитализацией за 3-4 недели до родов.
Справка! Несовместимость по резус-фактору на состоянии матери никак не сказывается, гемолитическая болезнь развивается только у ребенка. В тяжелых случаях и при отсутствии своевременной реакции плод может погибнуть еще в утробе или сразу после рождения.
Подготовка к процедуре и ее проведение
Для диагностики используют венозную кровь. Специальная длительная подготовка к проведению пробы Кумбса не требуется. Старайтесь соблюдать стандартный набор правил перед взятием крови из вены на анализ:
Метод исследования основан на реакции гемагглютинации.
При проведении прямой пробы на образец крови воздействуют заранее заготовленной антиглобулиновой сывороткой с известными показателями, выдерживают смесь некоторое время и проверяют на предмет агглютинатов, которые образуются при наличии на эритроцитах антител. Уровень содержания агглютинатов диагностируют с помощью агглютинирующего титра.
Непрямая проба Кумбса имеет сходную методику, но более сложную последовательность действий. В отделенную сыворотку крови вводят антигенные эритроциты (с резус-фактором) и только после этих манипуляций добавляют антиглобулиновую сыворотку для диагностики и титра агглютинатов.
Результаты исследования
В норме и прямая, и непрямая проба Кумбса должны давать отрицательный результат:
Справка! Антиглобулиновый тест отличается высокой чувствительностью, но имеет малую информативность. Он не регистрирует активность гемолитического процесса, не определяет тип антитела и не в состоянии выявить причину патологии. Для получения более полной картины, лечащий врач обязательно назначает дополнительные исследования (микроскопию крови, общий и биохимический анализ, ревмопробы, СОЭ, уровень железа и ферритина).
Причиной положительной пробы могут стать:
Ни одна из вышеперечисленных проблем не может быть решена пациентом без врачебной помощи. Во всех случаях потребуется срочная консультация, постановка на учет или экстренная госпитализация.
Внимание! В редких случаях возможна ложноположительная проба Кумбса. Причиной этого могут стать частые переливания крови, а также ряд заболеваний: ревматоидные артриты, красная волчанка, саркоидозы. Также это явление может наблюдаться после удаления селезенки, а также при нарушении хода реакции (частые встряхивания содержимого, наличие загрязняющих примесей).
Антиглобулиновый тест. Прямая и непрямая реакция Кумбса.
1. Что такое антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса?
Антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса проводится для того, чтобы выявить определенные антитела, которые атакуют красные кровяные клетки (эритроциты).
Антитела это белки, производимые иммунной системой. Как правило, антитела связываются с посторонними веществами, такими как бактерии и вирусы, и уничтожают их.
2. Зачем нужен тест на антитела?
Тест на антитела может проводиться в следующих случаях:
Перед переливанием крови
Вы наверняка знаете, что у человека может быть одна из четырех групп крови. И антиглобулиновый тест можно проводить для определения возможности переливания крови. Если вам делают переливание, кровь донора должна соответствовать вашему типу (иметь одинаковые антигены). Если при переливании антигены отличаются, иммунная система разрушит перелитые клетки. Это может привести к серьезным заболеваниям и даже смерти. Именно поэтому поиск нужного типа крови является столь важным фактором.
Для выявления риска резус-сенсибилизации
Женщине с отрицательным резус-фактором крови могут провести инъекцию анти-Rh- гаммаглобулина (например, RhoGAM), используемого для предотвращения развития Rh- гемолитической болезни.
Для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии
Аутоиммунная гемолитическая анемия является редким заболеванием, связанным с образованием антител к собственным антигенам эритроцитов.
3. Типы антиглобулиновой пробы
Существуют два типа антиглобулиновой пробы, или реакции Кумбса: прямой и непрямой.
Прямая реакция Кумбса, или прямой антиглобулиновый тест обнаруживает антитела, связанные с эритроцитами. Он используется для определения анемии. При этой болезни эритроциты разрушаются быстрее, чем производятся.
Непрямая реакция Кумбса, или непрямой антиглобулиновый тест проводится для поиска антител, не связанных с эритроцитами. Для пробы используется сыворотка крови, в которой и находятся антитела. Эта процедура достаточно редкая: в основном ее проводят для определения возможности переливания крови или как этап обследования беременных женщин.
4. Результаты реакции Кумбса
Отклонение от нормы:
Проба Кумбса прямая
Прямой антиглобулиновый тест
Синонимы русские
Прямой антиглобулиновый тест, ПАГТ, прямой тест Кумбса, прямая реакция Кумбса.
Синонимы английские
Direct antiglobulin test (DAT) with polyspecific antihuman globulin (AHG), Direct Coombs Test, Direct Anti-human Globulin Test.
Зачем нужно исследование?
В каких случаях назначается?
Какой биоматериал используется для исследования?
Как подготовиться к исследованию?
Особой подготовки не требуется.
Что исследуется?
Прямой тест на антиглобулин определяет, покрыты ли ваши эритроциты (эритроциты), циркулирующие в кровотоке, антителами. Антитела, которые прикреплены к поверхности эритроцитов, ответственны за их разрушение.
Есть несколько причин, по которым эритроциты могут быть атакованы антителами:
Несовместимость группы крови матери и ребенка. Мать и ребенок могут иметь разные группы крови, если ребенок наследует группу крови от отца. Во время беременности или родов мать может подвергаться воздействию эритроцитов ребенка. Эти эритроциты могут быть распознаны иммунной системой матери как чужеродные, и она будет вырабатывать антитела, направленные против эритроцитов ребенка. Эритроциты ребенка могут быть покрыты антителами, которые проникают через плаценту из крови матери в кровообращение ребенка. Эти антитела разрушают циркулирующие эритроциты ребенка и вызывают гемолитическую болезнь новорожденного. ПАГТ выполняется на крови ребенка, чтобы определить, прикрепились ли антитела к эритроцитам ребенка.
Это может происходить, когда у резус-отрицательной матери рождается резус-положительный ребенок. Этот тип несовместимости обычно не влияет на первого ребенка, но влияет на последующих детей. Раньше антитела к белку Rh были наиболее распространенной причиной гемолитической болезни новорожденных, но в настоящее время это состояние встречается редко из-за профилактического лечения, проводимого с резус-отрицательной матерью во время и после каждой беременности. В настоящее время наиболее распространенной причиной гемолитической болезни новорожденного является несовместимость группы крови между матерью группы О и ее ребенком. Этот тип фетально-материнской несовместимости, как правило, мягкий.
Кто назначает исследование?
Гематолог, трансфузиолог, терапевт, врач общей практики, ревматолог, педиатр.
Общие вопросы
Для чего используется исследование?
ПАГТ также может использоваться для диагностики гемолитической болезни новорожденного из-за несовместимости между группами крови матери и ребенка.
ПАГТ также может использоваться для диагностирования предполагаемой реакции при переливании крови.
Когда назначается исследование?
ПАГТ назначают когда врач хочет определить причину гемолитической анемии.
ПАГТ может быть назначен, когда новорожденный из группы риска или проявляет признаки гемолитической болезни новорожденного, которые могут включать:
ПАГТ будет назначен, если у вас было переливание крови, и у вас есть признаки и симптомы, такие как:
Что означают результаты?
Положительный ПАГТ означает, что есть антитела, связанные с эритроцитами. В целом, чем сильнее реакция ПАГТ (более позитивен тест), тем большее количество антител, связанных с эритроцитами. Но это не всегда соответствует серьезности симптомов, особенно если эритроциты уже разрушены.
ПАГТ обнаруживает присутствие антител, но не сообщает о причине или точном типе антител или о том, что вызывает симптомы. Ваша история болезни и клиническое обследование необходимы для определения причины положительного ПАГТ.
Некоторые примеры факторов, которые могут вызвать положительный ПАГТ:
Небольшой процент людей имеете положительный ПАГТ и не испытывает гемолитической анемии.
Отрицательный ПАГТ означает, что антитела, скорее всего, не прикреплены к эритроцитам, а признаки и симптомы связаны с другой причиной, которая требует дальнейшего изучения.
Если мать имеет несовместимость с первым ребенком, будет ли так со другими своими детьми?
Это зависит от того, имеет ли ребенок соответствующие антигены для антител матери. Если у ребенка группа крови О, у матери может быть гемолитическая болезнь новорожденного во время любой беременности. Когда у матери резус-фактор отрицательный, она может выработать антитела против эритроцитов своего первого резус-положительного ребенка, если она не получает профилактику. Любые последующие резус-положительные дети могут быть затронуты резус-антителами матери. В настоящее время это происходит относительно редко, поскольку резус-отрицательные матери проверяются во время и после беременности и им вводят инъекции RhIg (RhImmune Globulin, Rhogam) для предотвращения выработки антител к резус-антителам. Другие антитела могут также рецидивировать при последующих беременностях и должны быть обсуждены с врачом.