Анализ на чувствительность к антибиотикам
На сегодняшний день в медицине есть 3 метода определения чувствительности микробов к антибиотику:
По сути, вне зависимости от выбранного метода, анализ на чувствительность к антибиотикам сводится к выделению возбудителя болезни в чистой культуре с дальнейшим определением спектра чувствительности к тем или иным антибиотикам. Обязательно анализ на антибиотики делается с микроорганизмов, выделенных из первично стерильных жидкостей, органов и тканей человека (кровь, спинномозговая жидкость, моча, микрофлора влагалища и уретры).
В результате проведенного исследования составляется антибиотикограмма – это список антибиотиков, к которым чувствителен или не чувствителен исследуемый микроорганизм, единица измерения при этом – минимальное количество антибиотика, необходимое для уничтожения возбудителя болезни.
Все микробы подразделяются на 3 категории в зависимости от их устойчивости к антибиотикам:
В зависимости от результатов исследования на чувствительность к антибиотикам, врач назначает необходимые препараты, их дозы и продолжительность приема для оптимального лечения заболевания. Однако следует помнить, что чувствительность микробов «in vitro» (в пробирке) и «in vivo» (в живом организме) – это разные вещи. Здесь важно знать не то, какая концентрация микробов в пробирке с питательной средой, а их количество именно в пораженном органе. Сегодня технологии, с помощью которой можно было бы делать посев прямо из очагов болезни, нет, поэтому, несмотря на достаточно высокую точность анализов, следует помнить, что выявленная чувствительность к антибиотикам не всегда совпадает с реальностью, и на это должен сделать поправку врач, чтобы не допустить неэффективного приема пациентом антибиотиков.
Посев мочи на антибиотики
Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам делается из образцов изначально стерильных жидкостей. Остановимся на двух из них – моче и крови.
1. Анализ мочи на антибиотики – это метод, применяемый для диагностики инфекций в мочевыделительной системе человека, приводящих к возникновению цистита, уретрита, пиелонефрита, а также при диабете и дефиците иммунной системы.
Показания к проведению посева мочи:
Для анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо собрать утреннюю порцию мочи в специальную стерильную емкость, выпустив первые и последние капельки. Руки и половые органы перед сбором мочи следует тщательно вымыть. При таком способе забора мочи в лабораторию попадет максимальная концентрация микроорганизмов в случае их наличия у пациента. Будьте внимательны, сообщите врачу, если в последние дни перед сдачей анализов Вы принимали антибиотики – это может дать ложноотрицательный результат исследования. Продолжительность исследования – от одного до десяти дней в зависимости от типа микробов. За это время образец мочи подвергает различным анализам, и в результате определяется возбудитель инфекции, а также уровень его чувствительности к тем или иным антибиотикам, что помогает врачу принять правильное решение о назначении препарата.
2.Анализ крови на антибиотики также призван дать ответ на вопрос, есть ли в крови пациента бактерии. Бактериемия, то есть зараженность крови микробами – очень опасное явление, с этим шутить не стоит. Забор крови происходит до начала приема антибиотиков, поскольку они могут вызвать неправильный отрицательный результат.
Кровь берут из вены при помощи одноразового катетера в количестве 5 – 10 мл, ее помещают в специальную стерильную бутыль с резиновой пробкой, в которой приготовлена питательная среда для бактерий. Обычно результат известен уже через 16 – 18 часов, однако в случае, если бактерии относятся к медленно растущим видам, тогда за образцом крови наблюдают несколько дней до момента, когда рост бактерий становится очевидным.
После того, как установлены типы микроорганизмов в крови пациента, начинается исследование их на устойчивость к антибиотикам. В окончательный результат записывают идентифицированные виды бактерий в крови, а также сведения об их устойчивости к антибиотикам.
Результаты бактериологического посева крови могут быть следующими:
На этом исследование крови на антибиотики заканчивается, результат передается врачу, и он принимает решение о назначении тех или иных антибиотиков для лечения выявленного заболевания.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ:
МЕТОДЫ, РЕЗУЛЬТАТЫ, ОЦЕНКА
Решедько Галина Константиновна,
к.м.н., ассистент кафедры клинической фармакологии
Смоленской государственной медицинской академии
214019, г.Смоленск, ул.Крупской, 28, а/я № 5.
Тел.: +7(0812) 61 13 01, 61 13 27, Факс: (0812) 61 12 94,
E-Mail: galina@antibiotic.ru
Содержание
Резюме
В лекции рассмотрены основные методы определения чувствительности in vitro микроорганизмов к антимикробным препаратам (диско-диффузионный, Е-тестов, методы разведения). Отражены подходы к эмпирическому и этиотропному назначению антибиотиков в клинической практике. Обсуждены вопросы интерпретации результатов определения чувствительности с клинической и микробиологической точек зрения.
В настоящее время в клинической практике существуют два принципа назначения антибактериальных препаратов: эмпирическое и этиотропное. Эмпирическое назначение антибиотиков основано на знаниях о природной чувствительности бактерий, эпидемиологических данных о резистентности микроорганизмов в регионе или стационаре, а также результатах контролируемых клинических исследований. Несомненным преимуществом эмпирического назначения химиопрепаратов является возможность быстрого начала терапии. Кроме того, при таком подходе исключаются затраты на проведение дополнительных исследований.
|
Однако при неэффективности проводимой антибактериальной терапии, при нозокомиальных инфекциях, когда затруднительно предположить возбудителя и его чувствительность к антибиотикам стремятся проводить этиотропную терапию. Этиотропное назначение антибиотиков предполагает не только выделение возбудителя инфекции из клинического материала, но и определение его чувствительности к антибиотикам. Получение корректных данных возможно только при грамотном выполнении всех звеньев бактериологического исследования: от взятия клинического материала, транспортировки его в бактериологическую лабораторию, идентификации возбудителя до определения его чувствительности к антибиотикам и интерпретации полученных результатов.
|
Методы определения чувствительности к антибиотикам
Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения.
Рисунок 1. Определение чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом.
Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (рис. 2). В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).
Рисунок 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов.
Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод.
Рисунок 3. Определение значения МПК методом разведения в жидкой питательной среде.
Интерпретация результатов определения чувствительности
На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные (рис. 4). Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные концентрации (breakpoint) антибиотика (или пограничные значения диаметра зоны подавления роста микроорганизма).
Рисунок 4. Интерпретация результатов определения чувствительности бактерий в соответствии со значениями МПК.
Существуют два подхода к интерпретации результатов определения чувствительности: микробиологический и клинический. Микробиологическая интерпретация основана на анализе распределения значений концентраций антибиотика, подавляющих жизнеспособность бактерий. Клиническая интерпретация основана на оценке эффективности антибактериальной терапии.
Чувствительные микроорганизмы (susceptible)
Клинически к чувствительным относят бактерии (с учетом параметров, полученных in vitro), если при лечении стандартными дозами антибиотика инфекций, вызываемых этими микроорганизмами, наблюдают хороший терапевтический эффект.
При отсутствии достоверной клинической информации подразделение на категории чувствительности базируется на совместном учете данных, полученных in vitro, и фармакокинетики, т.е. на концентрациях антибиотика, достижимых в месте инфекции (или в сыворотке крови).
Резистентные микроорганизмы (resistant)
К резистентным (устойчивым) относят бактерии, когда при лечении инфекции, вызванной этими микроорганизмами, нет эффекта от терапии даже при использовании максимальных доз антибиотика. Такие микроорганизмы имеют механизмы резистентности.
Микроорганизмы c промежуточной резистентностью (intermediate)
Клинически промежуточную резистентность у бактерий подразумевают в случае, если инфекция, вызванные такими штаммами, может иметь различный терапевтический исход. Однако лечение может быть успешным, если антибиотик используется в дозировке, превышающей стандартную, или инфекция локализуется в месте, где антибактериальный препарат накапливается в высоких концентрациях.
С микробиологической точки зрения к бактериям с промежуточной резистентностью относят субпопуляцию, находящуюся в соответствии со значениями МПК или диаметра зон, между чувствительными и резистентными микроорганизмами. Иногда штаммы с промежуточной резистентностью и резистентные бактерии объединяют в одну категорию резистентных микроорганизмов.
Необходимо отметить, что клиническая интерпретация чувствительности бактерий к антибиотикам является условной, поскольку исход терапии не всегда зависит только от активности антибактериального препарата против возбудителя. Клиницистам известны случаи, когда при резистентности микроорганизмов, по данным исследования in vitro, получали хороший клинический эффект. И наоборот, при чувствительности возбудителя может наблюдаться неэффективность терапии.
В определенных клинических ситуациях, когда недостаточно результатов исследования чувствительности обычными методами, определяют минимальную бактерицидную концентрацию.
Значение МБК используют при терапии антибиотиками, обладающими бактериостатическим действием, или при отсутствии эффекта от антибактериальной терапии у особой категории больных. Частными случаями для определения МБК могут быть, например, бактериальный эндокардит, остеомиелит или генерализованные инфекции у пациентов с иммунодефицитными состояниями.
В заключение хотелось бы отметить, что на сегодняшний день не существует методов, которые позволили бы с абсолютной достоверностью прогнозировать клинический эффект антибиотиков при лечении инфекционных болезней. Однако, данные результатов определения чувствительности могут служить хорошим ориентиром клиницистам для выбора и коррекции антибактериальной терапии.
Таблица 1. Критерии интерпретации чувствительности бактерий
Определение чувствительности к антибактериальным препаратам всего спектра выделенной микрофлоры в Белгороде
Бактериологическое исследование, направленное на определение чувствительности выделенной микрофлоры к антибиотикам для подбора терапии.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Определение чувствительности к антибактериальным препаратам всего спектра выделенной микрофлоры?
Подбор терапии заболеваний с учетом чувствительности микрофлоры к антибиотикам.
Подробное описание исследования
Попадание микрофлоры в те или иные участки человеческого тела происходит уже при рождении, в процессе прохождения родовых путей матери. Далее во время грудного вскармливания осуществляется заселение желудочно-кишечного тракта микроорганизмами. Ребенок растет, и вместе с этим происходят изменения в структуре микробиома его кожи и органов. Значительные изменения связаны с введением прикорма, прорезывания зубов. Так, в кишечнике ребенка первого года жизни преобладают бактерии типов Proteobacteria и Actinobacteria. Ближе к 3-м годам микробиом становится ближе к взрослому по составу. В кишечнике детей этого возраста уже обнаруживается больше бактерий типов Firmicutes и Bacteroides.
Микробиом каждого человека уникален, однако имеются некоторые общие черты. Независимо от органа, в структуре микрофлоры имеются эубиотические виды бактерий, которые также называют полезными, и условно-патогенные виды. Эубиотические бактерии существуют в симбиозе с организмом человека и выполняют много важных функций. Например, в кишечнике они участвуют в переваривании поступившей пищи, образовании витамина К. Кроме того, устойчивый состав микробиома с преобладанием полезных бактерий обеспечивает полноценную иммунную защиту того или иного органа.
Условно-патогенные виды бактерий могут обнаруживаться в норме, но их доля в структуре микрофлоры у здорового человека небольшая. Рост численности условно-патогенных микроорганизмов, наряду со снижением количества представителей эубиотической флоры, может приводить к развитию инфекционных заболеваний.
В подобном случае необходима терапия препаратами антимикробного действия — антибиотиками и бактериофагами — вирусами, убивающими бактерии. Неоправданно широкое применение антибактериальных средств привело к появлению у микроорганизмов механизмов устойчивости (резистентности). Они способны вырабатывать ферменты, разрушающие антибиотики, изменять проницаемость мембраны клетки, активно выводить из нее поступающее лекарство. Ввиду этого, выбор антибактериальной терапии необходимо осуществлять с учетом того, способен ли препарат подействовать на возбудителя инфекции.
Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам
Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам – это микробиологический анализ высокой точности, проводящийся в условиях лаборатории. В благоприятную среду помещается биоматериал, в котором развиваются патогенные микроорганизмы. В настоящее время многие современные клиники предлагают такую услугу, в том числе и мы, «Доктор 2000».
Биоматериалом может быть не только микрофлора влагалища, но и мокрота, сперма, грудное молоко, желчь, секрет простаты. Этот анализ дает развернутую картину, имеет приемлемую стоимость и достаточно прост в выполнении. При помощи такого исследования специалист видит полную клиническую картину заболевания пациента, что дает ему возможность поставить правильный диагноз и определить, какую группу антибиотиков назначать для последующего лечения.
Фармакология не стоит на месте, и ассортимент антибиотиков велик, поэтому выделяют два основных способа определения чувствительности:
— к основному спектру антибиотиков;
— к развернутому спектру антибиотиков.
При помощи этой несложной процедуры происходит обнаружение таких микроорганизмов, как стафилококки, стрептококки, энтерококки, неферментирующие бактерии, энтеробактерии. Посев очень важен, так как лечащий врач должен непременно знать, какие именно антибиотики успешно справятся с течением болезни. Именно поэтому наличие аллергии на препарат не принесет должного результата.
Во время анализа просматривается, как биоматериал реагирует на тот или иной вид антибиотика, подавляются ли микроорганизмы предписанными дозами препарата или они остаются устойчивы к его воздействию. От этого во многом зависит правильный подход к локализации очага болезни.
Можно сделать вывод, что посев на флору необходим для установления возбудителя инфекции и подбора надлежащего препарата. Эта мера необходима для того, чтобы в случае нерезультативности предыдущего курса лечения выявить его причину.
Если в результатах вашего анализа вы видите латинскую букву R – это говорит о том, что биоматериал устойчив к действию антибиотика. Если же стоит буква S, значит, был проведен результативный курс лечения.
В заключении нужно отметить, что посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам – это лучшее исследование, которое можно провести для правильной постановки диагноза. Он является гарантом не только точной диагностики, но и определяет группу антибиотиков, которые хорошо воспринимает организм пациента.
Посев из уретры на микрофлору с определением чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам в Москве
Бактериологическое исследование материала, полученного при соскобе из уретры, для выявления причин воспаления в мочеполовой системе.
Что входит в комплекс
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Посев из уретры на микрофлору с определением чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам?
Подробное описание исследования
Мочеиспускательный канал (уретра) представляет собой орган в виде трубки, который находится в малом тазу, а у мужчин его часть располагается внутри полового члена. Через уретру моча выводится из мочевого пузыря наружу.
К бактериям, относящимся к обитателям мочеполовой системы, относят некоторые виды стафилококков, кишечной палочки, энтеробактерий, стрептококков, коринебактерий и других. Среди указанных микроорганизмов можно выделить эубиотические («полезные») бактерии, которые играют роль в поддержании здоровья уретры и защите ее от заселения потенциально вредных микробов. Также существуют условно-патогенные бактерии, не приносящие вреда, если они обитают в мочеиспускательном канале в небольшом количестве.
Избыточное размножение условно-патогенной флоры в уретре может вызывать ее воспаление (уретрит). Предрасполагающими факторами для этого могут быть: снижение иммунитета, нарушение гигиены мочеполовой области, наличие инфекций, передающихся половым путем. У женщин нарушение флоры уретры часто наблюдается вместе с дисбиозом влагалища.
При уретрите отмечается жжение и режущие боли в процессе мочеиспускания, выделения из мочеиспускательного канала с неприятным запахом. Из-за особенностей строение мочеиспускательного канала у женщин (более короткая уретра) у них чаще отмечается попадание инфекции в мочевой пузырь и развитие цистита, наряду с уретритом.
Диагностика уретрита основана на данных анамнеза, то есть оценке жалоб пациента и выяснении потенциальных причин воспаления мочевыводящих путей, а также на результатах лабораторных анализов. Среди них важную роль играет мазок/соскоб из уретры с последующим бак.посевом биоматериала.
В случае выявления избыточного роста условно-патогенных микроорганизмов выполняется определение их чувствительности к антибиотикам. Это важно для того, чтобы врач мог подобрать оптимальную терапию в условиях растущей устойчивости бактерий к противомикробным средствам.